熒光顯微鏡使用方法：

(1)將物料板放在載物臺(tái)上。

(2)打開調(diào)節(jié)器熒光顯微鏡。然后按下啟動(dòng)一套UV燈不能在15分鐘內(nèi)點(diǎn)燃，然后收盤不能重新啟動(dòng)3分鐘。

(3)將激發(fā)濾波器轉(zhuǎn)換為V，將分色器調(diào)整為V，選擇495或475nm阻塞濾波器。

(4)uvfl40.uvfl100熒光鏡檢查。

(5)在載玻片上加入非熒光油，先用40X，再用100X聚焦顯微鏡檢測(cè)熒光。

(6)視野檢查應(yīng)不斷變化，因?yàn)殡S著時(shí)間的推移，照射熒光物質(zhì)逐漸減弱。

(7)紫外FL10或紫外FL20也可用作低倍顯微鏡材料。

記錄熒光圖像的方法：熒光顯微鏡觀察到的熒光圖像具有形態(tài)特征、熒光顏色和亮度。在判斷結(jié)果時(shí)，要將判斷結(jié)合起來(lái)。結(jié)果是基于主觀指標(biāo)，即工人的眼睛。作為一般的定性觀察，它基本上是。隨著科學(xué)技術(shù)的發(fā)展，使用細(xì)胞分光光度計(jì)、圖像分析儀等儀器等客觀指標(biāo)來(lái)記錄判斷結(jié)果。然而，這些文件中記錄的結(jié)果也要與主觀判斷相結(jié)合。

熒光顯微鏡攝影對(duì)于記錄熒光圖像是非常必要的。由于熒光容易褪色和減弱，因此有必要記錄實(shí)時(shí)攝影的結(jié)果。這種方法與普通顯微鏡攝影方法基本相同。只需使用高速光敏膜，如ASA200或以上或24。在上面。由于紫外線對(duì)熒光的突然影響很大，如熒光標(biāo)志FITC，當(dāng)紫外線照射30秒時(shí)，熒光亮度降低50%，因此曝光速度太慢，無(wú)法捕獲熒光圖像。一般來(lái)說(shuō)，熒光顯微鏡具有半自動(dòng)或全自動(dòng)顯微攝影系統(tǒng)。

熒光顯微鏡注意事項(xiàng)：

(1)熒光顯微鏡是嚴(yán)格按照操作說(shuō)明書的要求制造的，不改變程序。

(2)檢查應(yīng)在暗室進(jìn)行。進(jìn)入暗室后，打開電源，點(diǎn)燃超高壓汞燈5-15分鐘。當(dāng)光源發(fā)出強(qiáng)光并穩(wěn)定時(shí)，眼睛能有效適應(yīng)暗室，然后開始觀察標(biāo)本。

(3)為防止紫外線對(duì)眼睛造成傷害，在調(diào)節(jié)光源時(shí)佩戴防護(hù)眼鏡。

(4)每次檢查時(shí)間為1~2h，超高壓汞燈發(fā)光強(qiáng)度逐漸降低，熒光降低;紫外線照射3~5分鐘后，熒光降低。因此，不超過(guò)2~3h。

(5)熒光光學(xué)顯微鏡使用壽命有限，檢查應(yīng)集中在樣品上，以節(jié)省時(shí)間，保護(hù)光源。天氣炎熱時(shí)，應(yīng)增加冷卻風(fēng)扇，應(yīng)開始新的記錄時(shí)間來(lái)更換燈泡。后燈可以點(diǎn)亮，然后熄滅。燈完全冷卻。每天幾次，避免火源。

(6)染色后，熒光會(huì)隨著時(shí)間，熒光會(huì)逐漸減弱。當(dāng)樣品儲(chǔ)存在4℃的聚乙烯塑料袋中時(shí)，可以延緩熒光衰減，防止密封劑蒸發(fā)。

(7)確定熒光亮度的標(biāo)準(zhǔn):一般分為四個(gè)層次，即“1”-NO或可見弱熒光?！?+-只能看到明顯可見的熒光。

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