檢驗科醫用顯微鏡的照明方式主要有以下幾種:
一、透射式照明
透射式照明適用于透明或半透明的被檢物體,絕大多數生物顯微鏡采用此類照明法。它主要有兩種照明方式:
臨界照明:光源經過聚光鏡后,成像于物平面上。若忽略光能的損失,則光源像的亮度與光源本身相同,相當于在物平面上放置光源。這種方法的缺點是,如果光源表面亮度不均勻,會嚴重影響顯微鏡觀察效果。其優點是結構簡單,光能損失少。
柯拉照明:柯拉照明解決了臨界照明中物面光照度不均勻的缺點。使用柯拉照明可使物面得到均勻的照明。光源發出的光線經聚光鏡后成像于可變光闌上,再經聚光鏡后成像于物鏡的人孔處,標本得到均勻照明。同時視場光闌經聚光鏡后成像于標本平面上,當改變可變視場光闌的大小時,物平面上的照明范圍會立即跟著變化。
二、落射式照明
落射式照明適用于非透明的被檢物體,光源來自上方,又稱“反射式照明”,主要應用于金相顯微鏡或熒光鏡檢法。在觀察不透明物體時,例如通過金相顯微鏡觀察金屬磨片,往往是采用從側面或者從上面加以照明的方式。此時,被觀察物體的表面上沒有蓋玻璃片,標本像的產生是靠進入物鏡的反射或散射光線。在某些G檔顯微鏡中,不僅需要透射光照明,也需要落射光照明,如熒光顯微鏡。
三、暗場照明
暗場照明是用暗視場方法可以觀察超顯微質點,這些質點是指小于顯微鏡分辨極限的微小質點。在通常的阿貝集光器下面加一個環形光闌,將中間光線遮住,僅使邊緣光線進入集光器。由于光線沒有直接進入物鏡,因此視場背景是暗的,可以做暗視場的透明體觀察。這種照明對于線形或點形、細微結構透明體觀察有較好的效果,如矽藻完皮、動植物的各種組織、血液和含有細菌的液體等。
四、其他照明技術
除了上述主要的照明方式外,還有一些特殊的照明技術也應用于醫用顯微鏡中:
明場照明:所有光源的光線通過聚光鏡聚焦于標本上,在明亮的背景下形成深色的圖像,是*簡單的技術方法,適用于所有顯微鏡。
相位差照明:通過在聚光鏡中使用“相位環”和物鏡中使用反向“相位板”來改變光的路徑,從而增強物體邊緣和低折射率元素的對比度。這種成像方式需要一個裝有特殊聚光鏡和特殊相位對比物鏡的顯微鏡。
偏振光照明:將一個偏光濾光片(偏光鏡)放在聚光鏡下面,另一個(偏光鏡)放在樣品上方的光路中。當旋轉位于下面聚光鏡上的偏振光鏡片相對于插入到上面的偏光鏡片時,所有偏振光被阻擋,圖像背景看起來非常暗。光穿過載玻片上的各類具有屈光差的物體可呈現出雙折射現象,從而在原本黑暗的背景下形成對比鮮明的物體。
綜上所述,檢驗科醫用顯微鏡的照明方式多種多樣,這些照明方式的選擇取決于被檢物體的特性、觀察目的以及顯微鏡的具體配置。